【出 处】：

【作 者】： 倪明 [1] ; 余冰 [2] ; 田德英 [1] ; 宋世会 [1] ; 谢琳卡 [1] ; 陈安群 [1]

【摘 要】目的研究新型突变的mucA基因对黏液型铜绿假单胞菌PA17生物被膜形成过程和成熟生物被膜形态的影响。方法将PAO1的mucA基因全长克隆到铜绿假单胞菌表达质粒pUCP20上，转化到含新型mucA基因突变的黏液型铜绿假单胞菌PA17，酶切、测序鉴定；异丙基-B—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导重组质粒表达，半定量逆转录（RT）-PCR检测IPTG诱导前后藻酸盐合成关键基因algD的表达水平；改良平板培养法建立PA17、含重组质粒的PA17及PAO1的生物被膜模型，扫描电镜观察其生物被膜形成过程。结果IPTG诱导后，表达重组质粒的PA17浮游状态时algD表达下降，证实PAO1的mucA基因转化PA17成功，其生物被膜形成速度居PAO1和PA17之间，8h时即可出现不可逆性黏附，6d形成成熟生物被膜，PA17、PAO1和含重组质粒的PA17所形成的成熟生物被膜形态相似。结论PA17所含的新型mucA基因突变造成PA17生物被膜形成初始阶段的不可逆黏附过程延迟，但对成熟生物被膜形态无影响。