噬菌体生物扩增法环节中最佳感染时间的探讨
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【摘 要】目的探讨影响噬菌体生物扩增法检出结核分枝杆菌敏感性的关键环节,即最佳感染时间。方法观察噬菌体生物扩增法中噬菌体1)29分别感染结核分枝杆菌0.0.5、1、1.5、2、3、4、5、6和8h对噬菌斑数量的影响。并且在电镜下直接观察噬菌体D29与结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌中共同孵育0、15、30、60、90、120、180、240、360min时,噬菌体的吸附、感染和增殖情况。综合上述两种方法结果确定噬菌体生物扩增法环节中的最佳感染时间。结果噬菌体感染结核分枝杆菌3—4h时,噬菌斑形成数量达到高峰[(321±2.65)PFU],4h后噬菌斑开始出现下降,5h时噬菌斑数为(300±5.62)PFU。在电镜下直接观察到噬菌体I)29与耻垢分枝杆菌接触15rain后,即开始吸附耻垢分枝杆菌,3h后完成子代噬菌体的合成。噬菌体D29与结核分枝杆菌接触3~4h时吸附感染部分结核分枝杆菌,6h后完成子代噬菌体合成。结论采用噬菌体生物扩增法检测标本中结核分枝杆菌需要多个环节,并且可以同时检测大量标本,为提高检测的敏感性以3h作为感染时间最为恰当。
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