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【摘 要】目的 利用焦磷酸测序技术检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、氧氟沙星、阿米卡星的耐药性，并对其临床应用进行评价。方法 收集上海市肺科医院2008--2009年临床确诊的肺结核患者的痰标本培养阳性结核分枝杆菌89株。所有菌株按《结核病诊断实验室检验规程》进行分枝杆菌培养、菌种鉴定。另外10株已知药敏结果的结核分枝杆菌来自上海市肺科医院菌株库。利用焦磷酸测序技术，以10株已知药敏结果和经直接测序已知耐药基因突变情况的结核分枝杆菌为试验菌株，探索焦磷酸测序检测结核分枝杆菌rpoB、katG、gyrA、邢耐药基因的最佳模式，并用该条件检测89株结核分枝杆菌临床分离株，检测结果与Bactec960药敏法进行比较。结果 rpoB、gyrA基因检测宜采用焦磷酸测序序列分析模式，katG、rm基因检测宜采用焦磷酸测序单核苷酸多态性模式。以Bactec960药敏法测定结果为判断标准，则焦磷酸测序法检测89株结核分枝杆菌临床分离株对利福平、异烟肼、氧氟沙星、阿米卡星耐药性的敏感度分别为98．0％、64．1％、79．5％、78．3％，特异度分别为97．5％、100．O％、90．0％、100．0％，准确性分别为97．8％、77．5％、85．4％、94．4％，该法检测利福平、氧氟沙星、阿米卡星的检测结果与Bactee960药敏检测结果一致性较好，Kappa值均≥0．7。结论 焦磷酸测序技术检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、氧氟沙星、阿米卡星耐药性具有快速、准确、高通量的优点，是一种可对结核分枝杆菌多种药物耐药性进行快速检测的方法。