应用基因芯片技术检测人脐带血CD34^+细胞体外扩增的巨核细胞基因表达
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【摘 要】目的 研究人脐带血CD34^+细胞体外扩增巨核细胞的基因表达,从分子水平探讨巨核细胞的表达机制。方法 采用密度梯度离心法和免疫磁珠分选系统获取人脐带血CD34细胞。100ng/mlTPO诱导培养12d后,应用抗CD41^+单克隆抗体免疫磁珠法分选巨核细胞。应用基因芯片技术检测巨核细胞、非巨核细胞和meg-01细胞株的基因差异表达。选择THBSl、HOXA9、B-actin、IL-8、ANXA6、FGF-8对检测结果进行RT—PCR验证。结果 巨核细胞样本与非巨核细胞样本比较,呈显著差异表达的基因有116个,其中52个上调,64个下调;巨核细胞样本与meg-01细胞株样本比较呈显著差异表达的基因有158个,其中71个上调,87个下调。THBSl在巨核细胞表达高于非巨核细胞,HOXA9在巨核细胞表达低于非巨核细胞;13一actin在巨核细胞与非巨核细胞的表达无差别。IL-8在巨核细胞表达高于meg-01细胞株;ANXA6在巨核细胞表达低于meg-01细胞株;FGF一8在巨核细胞与meg-01细胞株的表达无差别。结论 巨核细胞、非巨核细胞和meg—01细胞株基因表达存在显著差异,差异表达中的调控基因包括应激反应基因、免疫相关基因、DNA合成和修复基因、新陈代谢基凶、肿瘤基因和肿瘤抑制基因等。
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