【出 处】：

【作 者】： 颜英俊 ; 喻华 ; 周忠华 ; 鲁芳 ; 刘华 ; 乔宁 ; 黄文芳

【摘 要】目的研究耐亚胺培南（IMP）铜绿假单胞菌（Pa）外膜孔蛋白oprD基因突变方式和突变意义。方法对来自临床样本的34株耐IMP的Pa用PCR方法直接扩增oprD基因，扩增产物纯化后进行DNA双向序列分析，测得序列在www．ncbi．nlm．nih．gov／BLAST中的BLASTn（序列号：X63152．1 Pseudomonas aeruginosa PAO1）和BLASTx（序列号：NP249649．1 Pseudornonas aeruginosa PAO1）进行DNA序列和氨基酸序列分析，并与标准菌株ATCC27853和2株临床分离IMP敏感Pa比较，分析突变类型和可能影响的oprD外膜蛋白功能域。结果oprD基因突变率高达92．3％（12／13），突变方式多样（包括点突变、缺失突变、插入突变），导致外膜蛋白oprD L2、L3茎环结构上103、115、127、154、158、170、185、186、189位氨基酸改变和（或）移码突变。发现新的碱基变异位点（1079、1114、1196、1206、1288、1300、1301bp）和新的氨基酸突变位点（115、127、154、158、185、189位氨基酸）。以上突变在标准菌株ATCC27853和2株临床IMP敏感的Pa中均未检测到。结论oprD基因发生广泛有意突变，导致L2、L3茎环结构氨基酸改变和（或）移码突变，可能影响oprD与IMP结合，导致本组Pa对IMP耐药。